Реферат: Влияние малых доз радіаціі

Оцените эту книгу 
Это ..... х_хУверенны? о_ОУверенны? О_оА может ....Хорошо :)Отлично ;) (No Ratings Yet)

ЧЕРКАССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
ИМ. БОГДАНА ХМЕЛЬНИЦКОГО
естественный факультет
кафедра фізіологіі
_P ВЛИЯНИЕ МАЛЫХ ДОЗ РАДІАЦІІ
_P НА КЛЕТОЧНЫЙ ИММУНИТЕТ
Дипломная работа
студента 5 курса
естественного факультета
Научный руководитель
доктор биологических наук
Черкассы — 1996 г.
СОДЕРЖАНИЕ
Вступление…………………………………1
1. Обзор литературы
1.1 История исследований………………….3
1.2 Общая характеристика лейкоцитов……6
1.3 Характеристика Т — и В-лимфоцитов……..9
1.4 действие ионизирующего излучения на
Т-клеточный иммунитет………………..13
1.5 Действие ионизирующего излучения на
организм человека…………………….17
2. Материалы и методы исследования
2.1 Характеристика обследованных групп……….20
2.2 Методика определения субпопуляций
Т-лимфоцитов……………………….22
2.3 Методика подсчета числа
лейкоцитов вкрови…………………..24
2.4 Методика определения диференційованоі
формулы лейкоцитов………………….25
2.5 Определение уровня CD3+,CD4+,CD5+,CD8+.
лимфоцитов в периферической крови………28
2.6 Статистическая обработка данных……………29
3. Состояние клеточного иммунитета у
практиноздорових студентов ЧГУ……….30
4. Состояние клеточного иммунитета у лиц,
проживающих в зоне усиленного
радиационного контроля……………….33
5. Выводы………………………………42
Литература…………………………….43

__ ВСТУПЛЕНИЕ
АКТУАЛЬНОСТЬ РАБОТЫ
В настоящее время вважасться доказанным, что сильная или длительная действие
ряда неспецифических факторов окружающей среды может приводить-
дить к нарушениям клеточного иммунитета [ ]
Значительное место среди этих факторов займас ионизирующее вып-
ромінювання. Установлено, что острое воздействие радіаціі приводит к
нарушений в костном мозге и тимусі.
Следствием этих изменений с снижение імунноі ответа организма за
счет соотношений лимфоцитарных субпопуляций.
Ионизирующее излучение может вызвать множество морфо-
логических и функциональных изменений ізсторони імунноі системы человека.
Нарушение функций імунноі системы могут быть причиной вы-
возникновение ряда заболеваний: аутоиммунный тиреозит, бронхолегочные
заболевания, возникновение добро-и злокачественных опухолей и др.
Впечатление иммунокомпетентных клеток ведет к формированию вторин-
ного иммунодефицита, структура и выраженность которого зависит от
характера и дозы излучения, а также исходного функцио-
нального состояния облученного организма, и степени поражения ор-
ганов, обуславливающие функции іжмунноі системы.
Патогенные изменения функции імунноі системы, их проявления дас
возможность профилактики и своевременному лечению тех заболеваний в пато-
генезе которых лежит нарушение иммунного гомеостаза.
Это делает вопрос исследования влияния ионизирующего излучения-
ния на иммунную систему актуальным.
_» С ЦЕЛЬЮ__ дипломноі работы с изучения віддаленоі дии аварии на
ЧАЭС на клеточный иммунитет населения Украины.
_» ЗАДАЧИ__ которые ставились для достижения цісі цели:
1. Изучить експресіі Т-поверхностных клеточных маркеров в меш-
канців радиационно-загрязненных районов Украины.
2. Изучение модификации Т-лимфоцитарных рецепторов в сту-
студентов, подвергшихся воздействию малых доз радіаціі вследствие аварии на
ЧАЭС
3. Сравнительный анализ влияния малых доз радіаціі на Т-клеток-
ный иммунитет студентов различных факультетов ЧГУ.

__ НАУЧНАЯ НОВИЗНА
Впервые исследовано влияние на иммунитет дии комбинированного
іунізуючого излучения.
__ ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ РАБОТЫ
Дипломная работа выполнена в рамках темы, что викладасться в
ЧГУ по заказу Министерства Образования Украины «Влияние малых доз
радіаціі на клеточный иммунитет».
__

1. Обзор литературы.
1.1. История исследований.
Проблема влияния ионизирующего излучения на организм человека
и животных с одной из важнейших в экологической медицине, начинает-
ючи с 40-х годов нашего столетия.
В марте 1954 года на исследовательском полигоне ( Маршалловы
острова, США) было проведено взрыв термоядерноі бомбы с экспери-
ментальной целью. В результате взрыва имело место осаждение раде-
оактивних речовин на населенных аттолах.Проведенные исследования по-
говорили, что в районах выпадения радиоактивных веществ была высокая
радиоактивная загрязненность. Значительное число лиц, как среди местного
населения, так и среди участников исследований получили радиационные
впечатление в той или иной степени.
В результате исследований за потерпевшими были собраны ценные
сведения, освещающие некоторые аспекты дии іонізуючоі радіаціі
на человека. Исходные данные были дополнены повторными наблюдению-
ниями через 6 и 24 месяца с момента впечатление. На основе порівня-
ния полученных результатов с имеющимися данными о впечатлениях людей
в Хиросиме и Нагасаки, а также материалами, полученными при не-
щасних случаях в лабораториях и при экспериментах с животными
была сделана попытка установить предельно допустимую дозу излучения
ние для человека.
Было доказано, что излучение наиболее опасное в рай-
оные выпадение осадков, оно с проникающим его влияние может викли-
палачи такое же острое лучевое впечатление, которое наблюдалось в япо-
жителей в Хиросиме и Нагасаки. Облучение кожи лучами небе-
зпене i при отсутствии -излучения. Несмотря на то,что ко-
рне впечатление иногда з’являсться поздно, оно может привести к тяж-
ких последствий.
У лиц, подвергшихся действию радиоактивных осадков, может наблюдал-
гатися внутрішнс загрязнения радиоактивными веществами.Количество
радиоактивных веществ, депонированных в костной ткани, обнаружила-
ся небольшой и не вызывала гостроі реакции. Считали, что п-
ния, которые развиваются при этом, непродолжительные и нетяжелые,особенно как
что принять меры защиты против чрезмерного вдыхания радиоактивных
материалов. Основными проблемами медицинского контроля в местах вы-
падание радиоактивных осадков считали вопросы,связанные с обще-
им — и -облучением кожи [
материалов. Основными проблемами медицинского контроля в местах вы-
падание радиоактивных осадков считали вопросы,связанные с обще-
им — и -облучением кожи [
Особенно интересную группу исследований составили лабораторные тесты
по воздействию ионизирующего излучения на состояние імунноі системы и фу-
нкціональну способность ii составляющих. Так, опыты по изучению ран-
нип Т-клеток продемонстрировали статистически достоверное возрастно-зале-
жнет повышение уровня CD3-4+(8-) -лимфоцитов в периферической крови
потерпевших. Но общий уровень Т-клеток снижался, возможно,
вследствие возрастно-специфічноі деградаціі Т-клеточных функций. Или-
сло натуральных киллеров (НК) и клеток-предшественников цитотоксич-
ноі активности значительно повышалось у старых людей, подвергшихся
влияния радіаціі.
Было также установлено, что ежегодное увеличение средне время-
тоты соматических мутаций у облученного населения на одну величину
больше в Т-клеточном рецепторному комплексе и HLA-A2 [ ]
Как видим, приведенные исследования продемонстрировали, что один из
наиболее ярких эффектов влияния радіаціі на организм человека ха-
рактерний именно для імунноі системы. Подтверждением этому стали
исследования, проведенные после аварии на Чернобыльской АЭС.
В результате катастрофы на ЧАЭС возникло радиоактивное забру-
днення местности не только на территории Свропи, но и за ii предел-
мы — в США, Китай и Японии [ ]
В условиях радиоактивного загрязнения основное дозове нагружения-
ния формируют радионуклиды, попадающие в организм человека с
пищевыми продуктами, существенно влияя на состояние здоровья населе-
ня. Авария на ЧАЭС привела к возникновению безпрецендентного для
мирного времени положения, когда об’сктом действия малых доз іонізуючоі
радіаціі стали многотысячные контингенты населения.
Поскольку до спектра связанных с Чернобыльской катастро-
фою радионуклидов входят долгоживущие радиоизотопы, очевидно, что
ситуация, которая возникла, в значительной степени будет определять состояние здоровья
население Украины, по крайней мере, в ближайшей исторической перспективе.
Все это вимагас детального изучения последствий облучения малыми
дозами іонізуючоі радіаціі физиологических систем организма люди-
ны. Среди последних важное место опять-таки принадлежит иммунной
системе, оскількивона с равноправным звеном нейроімуноендокрин-
ного регуляторного контура, нарушения со стороны которого играют вы-
значительную роль в патогенезе наиболее распространенных хронических заболеваний
(атеросклероз, злокачественные новообразования, диабет, аутоиммунные процессы
и др.) [ ]
Следует иметь в виду, что в отличие от других физиологических
систем, определения показателей иммунитета, как правило, проводит-
ся в статическом режиме, а не в режиме функциональных нагружения-
жень, что обмежус возможность суждения о функциональный резерв
тестованоі системы, который визначас в конечном счете ii ис-
тивные возможности.
Любченко П.Н. с соавт. (1990) отмечают, что при воздействии
іонізуючоі радіаціі вражасться прежде всего клеточный иммунитет
(антигенрозпізнаюча звено) [ ]

1.2 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЛЕЙКОЦИТОВ
Лімфоідні клетки, с которыми связаны все иммунные механизмы,
появляются, созревают и функционируют в различных органах.
В них находятся клетки с ограниченным транспортом в организме, а
также многочисленные рециркулюючі клетки.
К клеткам імунноі системы относят лимфоциты: агранулоцити —
В — и Т-лимфоциты (незернисті лейкоциты). Лейкоциты относят к
белых кровяных клеток. В них с ядро и цитоплазма. Значительное число
лейкоцитов в крови дорослоі человека — в 1 мкл 6-8 тыс. Однако их
численность может меняться от времени суток, функционального ста-
ну организма. Различают физиологический и реактивный лейкоцитоз
(увеличение числа лейкоцитов).
Первый чаще спостерігасться после употребления пищи, во время
беременности при мышечной работе, сильных эмоциях, ощущении боли.
Второй вид характерен для воспалительных процессов и инфекционных
заболеваний.
Физиологический лейкоцитоз по своей природе являсться перероз-
подільним.
Реактивный лейкоцитоз оклеветанный повышением выброса из органов
кровоутворення клеток i пероеважно молодых. В этом приймас
участие костный мозг, легкие, селезенка [ ]
Лейкопения — уменьшение количества лейкоцитов) характеризус
протекание некоторых инфекционных заболеваний. Спостерігасться в ос-
ледние годы неинфекционная лейкопения связана главным образом с
підвищеннямрадіаційного фона. Особенно острой она бувас при уш-
кодженні кесткового мозга в результате облучения [ ]
Количественное соотношение различных видов лейкоцитов периферичноі
крови называют лейкоцитарной формулой. Отклонения лейкоцитарноі
формулы являсться важным диагностическим показателем при разно-
ных заболеваниях [ ] В норме она являс следующее
соотношение в % [ ]:
базофилы 0 — 1
эозинофилы 0,5 — 5
палочкоядерные нейтрофилы 1 — 6
сегментоядерні нейтрофилы 47 — 72
лимфоциты 19 — 37
моноциты 3 — 11
Все виды лейкоцитов обладают амебоідною рухливістюидкість ру-
ху может достигать до 40 мкм/мин.
При наличии определенных химических раздражителей лейкоциты могут
выходить через эндотелий капилляров и направляться к подразни-
ка, микробов клеток, которые распадаются чужородного тела или ком-
плекса антиген-антитело. По отношению к ним лейкоциты во-
обладают положительным хемотаксисом. Свосю цитоплазмой лейкоциты
способны окружить чужородне тело и с помощью специальных фер-
ментов переваривать его (фагоцитоз).
Один лейкоцит может захватить 15-20 бактериальных клеток (моно-
цит). В лейкоцитах содержится целый ряд ферментов пептидазы,(липы-
зы…).В обычном состоянии ферменты находятся в лизосомах —
изолированно. Лейкоциты способны адсорбировать некоторые вещества и пе-
сити их на своей поверхности.
Более 50% всех лейкоцитиі розміщусться за чертой сосудистого
русла — гістоцити, 30% в костном мозге. По отношению к лей-
коцитів кровь виконус транспортную функцию, доставляя их от
места образования к различным органам[ ]
В зависимости от того, содержит ли цитоплазма зернистость или во-
на однородна, лейкоциты делят на 2 группы гранулоциты и агрануло-
цити[ ]Гранулоциты составляют 60% всех лейкоцитов крови, время их
жизнь примерно 2 суток.
Гранулоциты разделяют на виды:
1. Эозинофилы — гранулы которых окрашиваются кислыми красками (в
розовый цвет);
2.Базофилы — основными красками (синий цвет)
3.Нейтрофилы способны воспринимать те и вторые краски (розово-фио-
летовий цвет).
Увеличение числа эозинофилов — эозинофилия, виникас при
аллергической реакции, при этом в организме образуются антитела
против собственных клеток [ ]
На мембране базофилов рецепторы к которым присднуються определенные
глобулины плазмы крови. Так утворюсться иммунный комплекс. С игра-
н звільнясться гістимін, который викликас расширение сосудов, спазм
бронхов, зуд.
Нейтрофилы в зависимости от возраста имеют ядро різноі формы
(поліморфоядерні): у юных — ядро круглое; у молодых — в виде
палочки; зрелые — сегментоядерні. С возрастом ядро клеток перешнуро-
вусться i розділясться на несколько сегментов [ ]
Нейтрофилы с найбільшважливими элементами неспецифической за-
умения системы крови, которые способны обезвреживать даже такие чуждо-
родни тела с которыми организм ранее не встречался. Они будут-
слышатся в местах повреждения тканей или проникновения мікроро-
ганізмів, захватывают и переваривают их. Нейтрофилы адсорбируют
тех выделяют на поверхнімембран антитела против микробов и чу-
жерідних белков. I таким образом нейтрофилы тоже обеспечивают иммун-
ный механизм защиты.
Агранулоцити (незернисті лейкоциты) разделяют:
1. Моноциты
2. Лимфоциты
Моноциты — самые крупные клетки крови, они имеют округлую фор-
м i хорошо выраженную цитоплазму. Моноциты также способны к аме-
боідного движения i характеризуются самой высокой фагоцитарной ак-
тивністю.

1.3 ХАРАКТЕРИСТИКА Т — И В-ЛИМФОЦИТОВ
В зависимости от функциональных свойств различают 2
основных класса лимфоцитов: Т — и В-клетки.
Тимусозалежні лимфоциты (Т-лимфоциты), в свою очередь, об-
ют ряд подклассов. Одни из них обеспечивают выполнение регулято-
пп функций, в частности, могут «помогать» ( «хелперы» ) или «по-
давляти» («супрессоры») развитие імунноі ответы, в том числе
образование антител. Другие выполняют эффекторные функции, например,
производят растворимые реовини, которые способствуют возникновению реакций за-
воспаление или осуществляют прямое разрушение клеток, несущих на со-
би антигены.
Таким образом, выделяют Т-хелперы, Т-супрессоры, Т-киллеры и
Т-клетки реакций сповільненоі гиперчувствительности.
Т-лимфоциты образуются из стволовых кроветворных клеток тка-
нин i проходят стадию созревания в тимусі. К этому времени остаточ-
но не решили, один или разные предшественники для хелперных, супре-
сорних и цитотоксических клеток. С сведения, что тімоцити мозковоі
зоны принадлежат к другому ряду дифференцировки, чем тімоцити кірко-
вои зоны. Известно также, что основную массу клеток тимуса составляют
субпопуляціі CD4-8-, CD4+8+, CD4+8-, CD4-8+ (двойные негативные,
двойные положительные, одинарные позитивные клетки).
Двойные негативные — незрелые (immature), CD4-8 — преобладают
в тимусі эмбрионов. Их количество зростас при регенераціі тимуса
после облучения. По свойствам i фенотипа они близки к ки-
стково-мозговых предшественников тімоцитів. Эти клетки, несущие
CD5 -антиген (CD4-8-5+), обеспечивающих генерацию 3-х основных суб-
популяций тімоцитів (CD4+8+,CD4+8-,CD4-8+).
Двойные позитивные клетки считаются незрелыми и неспособными
до дальнейшего созревания, они обречены на гибель в тимусі.
Одинарные положительные клетки — почти зрелые,но не идентичны пе-
риферичним Т-клеткам.
Лимфоциты периферичноі крови относятся к клеткам с комплекс-
им типом антигенноі специфичности. Они способны распознавать од-
одновременным продукты собственных МНС-генов (гены главного комплекса гис-
тосумісності) и чужеродные антигены. Главный комплекс гістосумі-
собственности — основная генетическая система, визначас функционирования
мунноі системы, и, прежде всего, Т-системы иммунитета. Выделяют 2
группы молекул главного комплекса гистосовместимости — молекулы МЧС
класса I и молекулы МНС класса II.
Молекулы МНС класса I — мембранные глікопротеіни,обнаружены бук-
вально во всех клетках. У человека 3 локусы, кодирующие молекулы
класса I — HLA-A, HLA-B, HLA-C.
Молекулы класса I определяют специфичность узнавания мишени
алогенними клетками-киллерами i распознаются вместе с вирусами,
опухолевыми и другими мембранными антигенами цитотоксическими Т-кли-
заборами.
Молекулы МНС класса II (у человека HLA-Dr и HLA-Dc) играют
главную роль в стимуляціі проліфераціі аллогенных Т-клеток,что стекла-
дас основу імунноі ответы в смешанной культуре лимфоцитов. Рас-
узнаются Т-хелперами и другими Lyt 1+ -клетками, производят
ИЛ-2 для усиления цитотоксичноі активности [ ].
Рассмотрим отдельные подклассы Т-клеток.
Т-хелперы (индукторы). Існус три типа этих клеток. Первый —
імфоцити, что узнают элементы главного комплекса гістосуміс-
ности. Они имеют специфичность к антигенам, связанных с влас-
ими Іа-белками. Эти лимфоциты индуцируют пролиферацию В-клеток i
их дифференцирование к антител-образующих клеток. Вторую группу стекла-
дают Т-хелперы, что узнают иммуноглобулины. Они обладают спе-
цифічністю как к антигену, так и к собственным изотопических детермі-
нант. Активируют В-клетки, имеющие такие же детерминанты. Третья
группа Т-хелперов секретус лімфокінін (ИЛ-2). Они узнают анти-
ген в комплексе с собственными Ia-детерминантами.
Регуляторная функция Т-хелперов полягас в стимулировании способности-
ваты В-клетки к проліфераціі i диференціаціі в антитілоутворюючі
клетки. Ответ В-клетки на большинство белковых антигенов пов-
ностью зависит от помощи Т-клеток. Такие антигены — тимусозалеж-
нет.
Помощь Т-хелперов здійснюсться двумя способами. Первый —
прямая взасмодія Т-хелпера i реагуючоі В-клетки (когнантна помо-
га). В этом случае Т-клетка розпізнас детерминанты антигенноі
молекулы, уже фіксованоі на В-клетке. Также розпізнаеться продукт
МЧС-гена на поверхности В-клетки (МНС класса II). Второй способ поля-
керосин в образовании растворимых неспецифических хелперных факторов — лим-
фокінінів. Это оба фактора роста (в первую очередь фактор, что регу-
люс пролиферацию В-клеток и ответ на антигенную стимуляцию).
Одна и та же Т-клетка может здіснювати хелперную функцию как на
основе когнантноі взаемодіі, так и с помощью медиатора. Некоторые
Т-клетки играют роль усилителя хелперноі дии. Они действуют на
уже стимулированные В-клетки.
Т-супрессоры составляют группу клеток, которые способны подавлять
иммунный ответ. Т-супрессоры действуют, регулируя численность Т-хел-
пэров. Прямое влияние этих клеток на В-лимфоциты изучен недостаточно.
Супрессорная система включас три клеточные формы. Форма Ts 1 спе-
цифічна к антигену i виробляе фактор TsF 1. Он активус Ts 2, спе-
цифічний против ідіотипів антител к антигену, связанному Ts 1.
TsF 2 активус клетку TsF 3, которая супресорно дис на хелперні Т-кли-
заборы.
Существуют также Т-контрсупресорні клетки (с фенотипом Ly 1).Во-
ны предотвращают інактиваціі Т-хелперов супресорними клетками. Види-
играют важную роль для развития толерантности при імунологічноі
активной супресіі.
T-цитотоксические клетки несут маркеры, схожие с супресорними
клетками (Lyt 2).Они лізують клетки, несущие на поверхности ан-
тигени, в которых специфические данные лимфоциты.
Первая стадия лизиса — распознавание антигена и молекул кла-
су I на поверхности клетки-мишени. Далее идет разрушение цісі клетки.
Т-цитотоксические клетки могут участвовать в нескольких циклах ли-
зису, сами при этом не разрушаясь. Их еще называют Т-киллерами.
Кіллерні клетки играют важную роль в защите от вирусных
заболеваний и в противоопухолевом иммунитете.
Особую группу составляют естественные киллеры (НК). Они способны
убивать некоторые виды опухолевых клеток, используя совсем другие
способы распознавания, чем Т — и В-лимфоциты [ ].
Существуют данные о различную радиочувствительность популяций i
субпопуляций лимфоцитов: наиболее радіочутливими считаются Т-су-
пресори, а наиболее радіорезистентними — Т-хелперы [ ]
Однако некоторые авторы считают, что различия в радіочутливо-
сти в условиях in vivo могут быть обусловлены какими-то определенными фак-
торами, возможно даже разными пропорциональными соотношениями
отдельных лімфоцитних субпопуляций. Поэтому N. Nakamura с соавтора-
мы (1990) оценили ответ каждому субпопуляціі Т-лимфоцитов на
ионизирующее излучение в условиях in vitro. Исследователи использовали
методику клонирования Т-клеток в присутствии фактора роста интер-
лейкіну-2 (IL-2). Исследования показали, что фракция колоний лим-
фоцитів CD4+ составляло 30-50% от общей количества клеток i
фракция колоний CD8+ — 15-20%. Вообще, более 97% сортированных
клеток несли на своей поверхности CD4-или СD8 -поверхностные антигены.
Доза облучения не превышала 5 Гр, поскольку при большей дозе
клетки погибают.
Результаты четко продемонстрировали, что радиочувствительность CD4+
i CD8+ -лимфоцитов очень похожа. Анализ колоний несортированных лим-
фоцитів показал, что они несут поверхностные маркеры CD4 — и CD8-
(то есть, не имеют хелперных или супрессорных свойств). Хотя не
было точно определено, присутствует ли на них маркер взрослых лимфо-
цитів CD3, ученые решили, что большинство из них — натуральные кругов-
леры. Оказалось, что радиочувствительность этих клеток также не отрез-
нясться от радиочувствительности CD4+ или CD8+. N. Nakamura делает выс-
вывод, что в условиях in vitro гипотеза о наибольшей радіочутли-
весть Т-супрессоров не підтверджусться. Возможно, в этих условиях пе-
реважну большинство клеток с поверхностным антигеном CD8 составляют
те, что не выполняют супрессорных функций [ ]

1.4 ДЕЙСТВИЕ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА Т-КЛЕТОЧНЫЙ ИММУНИТЕТ
Как же реагируют предшественники Т-лимфоцитов на іонізуючче электрон-
тие? Влияние радіаціі на иммунную систему (в частности, ii тимусозалежну
звено) изучен недостаточно. Т.Ю.Харченко с соавт. (1994) прове-
ли исследования на мышах, осуществив облучения в период органоге-
незу. Закладка и формирование тимуса мышей проходит на 7-12 сутки ро-
звитку эмбриона. Именно в этот период организм наиболее чувствителен к
гии ионизирующего облучения, его результатом может быть спотворен-
ния или гибели новорожденных.
На 9-е сутки эмбрионального развития мышей закладасться стро-
ма тимуса, на 13-ту — закінчусться первая волна заселения тимуса
лімфоідними предшественниками, проходит формирование коркового и мозко-
ного слоев тимуса, здійснюсться перестройка генов — i -цепей
рецептора Т-клеток для Thy-антигена. К 17-и суток завершусться пе-
ребудова генов клеточного рецептору, проходит его экспрессия на
поверхности тімоцитів, формируются основные субпопуляціі СD4-8-,CD4+8+,
CD4-8+, CD4+8- -тімоцитів. С этими же сроками связана вторая
волна заселения тимуса клетками-предшественниками Т-лимфоцитов.
В эти критические сроки развития тимуса облучали беременных
самок с последующим исследованием содержимого и популяционного состава кли-
плетень тимуса и селезенки. Дозы облучения варьировали от 0,15 до
4 Гр. Анализ проводили в первые сутки и через 2 недели после р-
ння. При облучении на 9-й день беременности плод погибал при дозе
0,5 Гр, на 13-е сутки — при дозе 0,7 Гр, при облучении на 17-ю
сутки доза 0,15-4 Гр не препятствовала беременности и родам.
Оказалось, что при дозе радіаціі, меньшей 1 Гр, значительных изменений в
клітинності тимуса немассовые. А при дозах 0,15 и 0,3 Гр спостерігасть-
ся даже повышение клітинності. Облучения в дозах 1, 2 и 4 Гр
на 17-е сутки развития приводит к снижению клітинності тимуса i
селезенки, доза в 1 Гр на 13-е сутки — к снижению клітинності ли-
е в селезенке. Возможно, тімоцити в этот период более резистентны,
чем в более поздние сроки. Действительно, на 13-е сутки развития 100% тимо-
цитів составляют СD4-8 — предшественники Т-клеток, которым свойственна до-
сить высокая радиорезистентность.
Данные свидетельствуют о высшем радиорезистентность тімоцитів 17-ти до-
бового плода, чем тімоцитів взрослых мышей. Очевидно, и в этом вы-
случае речь идет о разное соотношение субпопуляций тімоцитів, что
отличаются в радиочувствительности. Действительно, содержание радіорезистентних
CD4-8 — клеток складас в этот период 40%, тогда как у взрослых мышей
3-5%.
И все же у облученных в эмбриональный период мышей сплостері-
гасться отставание в клітинності тимуса, которое при дозе менее 1 Гр
ліквідусться на 30-е сутки (после этого клитиннисть даже выше,
чем у необлученных). При дозе более 2 Гр отставание остается
и под конец месяца. Для клеток селезенки характерны более глубокие изменения,
которые не ликвидируются до 30-и суток жизни. Зато при облучении в до-
рослому возрасте клитиннисть тимуса скорее відновлюсться у мышей, которые
были облученные в период внутриутробного развития.
Содержание в тимусі i селезенке Thy 1+, CD4+ и CD8+ -клеток прак-
тически не відрізнясться по относительному составу от контроля (электрон-
тие проведенное на 14-е сутки беременности, оценка состояния — через 14
суток после рождения). Ученые делают вывод, что описаны выше
изменения в содержании тімоцитів в результате облучения обусловлены дісю
радіаціі преимущественно на юные тімоцити, без существенного влияния на последо-
дуючу дифференциацию клеток-предшественников, что выжили, i дивергенцию
субпопуляций [ ]
Обычно считают, что впечатление лімфоідних популяций тимуса с
результатом исключительно пошкоджуючоі действия ионизирующего облучения как
такого.В то же время с много доказательств стресорного эффекта опромінен-
ния и возможности опустошение тимуса и развития лімфопеніі в резуль-
тати повышение сироваточного уровня кортикостероидив, обусловленного
стрессом.
М.П.Савина и А.А.Ярилін (1994) провели исследование, в котором
пытались выявить, впливас на клитиннисть тимуса локальное оп-
ромінення гипофиза, гонад, селезенки и бедра. Эксперимент
проведено на мышах. Доза радіаціі варьировала от 1 до 10 Гр. Анализ
проводился через 1 сутки, 1, 3 и 12 месяцев после облучения.Вия-
вилось,что при локальном облучении любой орган клитиннисть
тимуса снижалась. Однако,сроки нор мализации числа тімоцитів бу-
ли различными. При облучении бедра и селезенки уровень Т-клеток
восстанавливался через сутки; гонад — к концу первого года. При опро-
міненні самого тимуса (10 Гр) снижение уровня тімоцитів отмечено-
ся на протяжении всего периода наблюдений. Ученые делают вывод,
что в формировании позднего Т-клеточного дефицита відіграс роль не
только облучение тимуса, но и стабильные эндокринные нарушения пис-
ля облучения гипофиза и гонад (но не селезенки и бедра).
При локальном радиационном воздействии на тимус (1 ; 10 Гр), гіпотала-
мусс, гонады, селезенку и бедро (10 Гр) раннс опустошение тимуса
может быть вызвано как непосредственным дісю облучения на орган,
так и повышением уровня гормонов — медиаторов стресовоі реакции
при дии радіаціі на другие органы [ ]
Некоторые авторы считают, что ионизирующее облучение в малых до-
зах может осуществлять стимулирующее влияние на организм с увеличением
массы тела, средне продолжительности жизни, повышением устойчивости к
различных неблагоприятных воздействий и инфекций благодаря активаціі иммунных
реакций. Хотя связанные с этим исследования проводились на животных,
клеточные механизмы упомянутых эффектов до настоящего времени практически не вы-
ученые. Н.А.Слісесва с соавторами ( 1994 ) исследовали механизмы
стимулюючоі действия малых доз облучения на иммунитет, в частности, на
бласттрансформацію лимфоцитов крови крыс по критерию включения
Н-тимідину в ДНК. Причем проверяли как самостоятельный влияние электрон-
ние, так и его эффект на фоне стимуляціі мітогеном. В качестве ми-
тогену брали Конканавалин А. Мітоген вносили в культуру за 10 мин
до облучения. Дозы варьировали от 1 до 6 сГр. Исследователи відміти-
ли большое разнообразие чувствительности животных к мітогену (в зависимости
симости от этого их разделили на 3 группы). Возможно, причина этого —
разнообразие в начальном содержании лимфобластов в крови различных
животных и в разной начальной чувствительности рецепторов лимфоцитов к
мітогену. Результаты исследований показали отсутствие стимуляціі
лімфоідноі проліфераціі при облучении без мітогену i усиление
бласттрансформаціі при облучении в дозах 0,09-6 сГр на фоне
Кон А (при суммарной дозе 12 сГр уровень снижался до контроля).
То есть, облучение само по себе не с стимулятором проліфераціі ли-
мфоцитів крови, но в сочетании с мітогеном способна усиливать йо-
го стимулирующее воздействие на клетки імунноі системы [
I. М.Беляков с соавторами выдвинул мысль о существовании «сти-
мулюючих доз», при которых в культуре з’являюься ростовые факторы
Т-клеток. Они провели исследование влияния -облучения в новона-
роджених мышей на пролиферативную активность эпителия камбіального
в культуре стромальных клеток тимуса. Оказалось, что облучение в
момент высева культуры послаблюс пролиферацию клеток в логарифміч-
ней фазе роста. После 2 суток культурування облучения в дозах 10 и
20 Гр подавляло пролиферацию эндотелиальных клеток (ЭК) тимуса.Но
доза 15 Гр вызвала усиление проліферативноі активности. Если
оценка результатов проводилась через 48 часов культурування (а не
через 24, как в первом случае) усиление проліфераціі наблю-
лося при дозах 5, 8 и 15 Гр. При 10 Гр — ингибиция, после 20 Гр —
ослабление проліфераціі.
Ученые предполагают,что стимулирующие дозы» меняют интенсивность
межклеточных контактов ЭК с другими клетками стромы тимуса. Этот
обмен проходит медленно, поэтому последствия повреждений могут проявления-
ваться на уровне целого организма относительно поздно. В конечном резуль-
тати эти повреждающие эффекты радіаціі на ЭК тимуса должны отра-
зитися на содержании в строме тимуса эпителиальных клеток, их функцио-
уголовном активности, эффективности процесса развития Т-лимфоцитов.
Очевидно, последствиями именно таких изменений с заресстровані проявления Т-кли-
тынного иммунодефицита у лиц, подвергшихся воздействию факторов аварии на
ЧАЭС через 5 лет после их дии.
Вообще, исследования Білякова показали,что эффект радіаціі о-
являсться в усилении деления Т-клеток, которые без облучения перехо-
дят в состояние покоя, то есть становятся более зрелыми, функционирующими
клетками [

1.5 ДЕЙСТВИЕ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА ОРГАНИЗМ ЧЕЛОВЕКА.
Г.В.Петров с соавт. (1994) отмечают, что для імунноі сис-
темы характерна высокая мобильность, связанная с тем, что все ii го-
головного компоненты практически всегда находятся в активированном (рабо-
почему) состоянии и определенный уровень активаціі, пожалуй, с нормальным состоянием
імунноі системы. Под влиянием антигенных и неантигенних проявлений
(которым может выступать ионизирующая радиация), что непрерывно поступа-
ют в внутрішнс среду организма, иммунная система постоянно сми-
нюс свой учет, уровне своих составных частей (Т-хелперов, Т-супре-
прессоров, Т-контрсупресорів i т.д.). При возникновении реакции на зов-
шний влияние иммунная система будет «взбудораженная» до того времени, пока не
перейдет в новое равновесное состояние. Это состояние зберігасться до того ча-
су,пока другой стимул не поступит снаружи или не возникнет в организме.
Если антигенные стимулы проникают в организм непрерывно, очевидно,
иммунная система непрерывно будет меняться и находиться в движении.
В свете концепции иммунологических мобилей по новому виникас питан-
ния о нормативные параметры імунноі системы. Например, повы-
повышение уровня клеток-хелперов еще ничего не означас, когда не вистачас
макрофагов. Наоборот, малое число помощников может быть идеальным,ко-
ли немассовые супрессоров [ ]
Первые же исследования состояния імуноі системы у людей, принимавших
участие в ліквідаціі последствий аварии на ЧАЭС продемонстрировали пору-
нарушение в клеточном звене иммунитета. Содержание Т-общих лимфоцитов
был снижен, Т-активных — повышенный. Снижение количества Т-лимфо-
цитів наблюдалось у 57% обследованных, повышение числа Т-активных
— у 75% обследованных.Учитывая различия в дозе облучения лиц,
работавшие в 1986 и 1987 гг., был проанализирован материал в за-
зависимости от времени пребывания в Чернобыле. Любченко П.Н. со со-
авторами (1990) установили, что количество Т-клеток у тех,кто труд-
вав в Чернобыле в 1986 и 1987 гг., существенно не отличалась и была
достоверно ниже, чем в контроле. Количество Т-клеток, активно
образовывали розетки, у лиц, работавших в 1987 году, была достило-
верно ниже, чем у тех, что работали в 1986 году, но перевищува-
ла уровень в контрольной группе [ ] Любченко відзначас, хотя ис-
нус мнение о быстрое восстановление состава лимфоцитов уже к концу
второго месяца, с доказательства медленного восстановления количества именно Т-
лимфоцитов. Его последующие исследования показали, что у лиц, которые
принимали участие в ліквідаціі последствий аварии на ЧАЭС i которые труд-
валы в Чернобыле в 1986 году, даже через 5-5,5 рр. отмечались
нерезко выраженные, но стойкие нарушения клеточного иммунитета.Причем-
м сильнее страждас субпопуляция CD4+ -хелперов, формирование которых
зависит от тимуса, чем CD8+ -супрессоров [ ]
В.С.Смирнов с соавт. (1990) проводили исследования населен-
ния, которое подверглось воздействию факторов аварии на ЧАЭС через 2 года после
катастрофы. У пострадавших было выявлено существенное повышение ин-
ного и абсолютного числа Т5+ -лимфоцитов, в основном за счет
Т8+ -субпопуляций. Но достоверное снижение относительного содержания Ea-
РОК и угнетение лімфокіноутворюючоі активности Т-лимфоцитов свид-
тельствует о том, что функциональная активность Т3+ -лимфоцитов была си-
льно подавлена. Возможно, определенную роль в депресіі иммунных реакций
играли активированные Т-супрессоры. Таким образом, исследования состояния
иммунитета у людей, подвергшихся воздействию радіаціі в дозах 0,2-0,5 Гр
во время аврии на ЧАЭС показали, что иммунологические нарушения, которые вы-
исчезли при этом, могут храниться в течение 2 лет после электрон-
нення. Было сделано предположение, что нестабильность иммунного стату-
су обусловлена нарушениями генетического аппарата клетки, что проявля-
ются в конформационных изменениях ссДНК. Глубина снижения функ-
ноі активности и изменений соотношения субпопуляций лимфоцитов зна-
ходится в прямой зависимости от степени деспирализации ссДНК (ра-
діаційно обусловлена деспіралізація ДНК лимфоцитов супроводжусться
угнетением, а повышенная суперспіралізація — нормалізацісю боль-
шестые реакций імунноі системы) [ ]
Изменения в состоянии Т-клеточного иммунитета были обнаружены не только в
ликвидаторов аварии на ЧАЭС, но и у жителей радиационно забруд-
освободившихся районов. Так, А.Ф.Мельников с соавт. (1993) дослілили состояние
імунноі системы в городе Кисві за первые 4 года после катастрофы.
Проведенные исследования показали, что в течение первого года после
аварии наиболее выраженные изменения определялись со стороны НГК (натуральных
цитотоксических клеток) и К-киллеров, которые играют важную роль в
реализации противоопухолевого и противовирусного иммунитета. Функционализма-
льна активность этих клеток была резко снижена. Значительно менее выражен-
ный характер имели изменения со стороны Т-лимфоцитов периферичноі крови об-
стежених, которые проявились в основном тенденцісю к снижению за-
общего содержания Т-клеток (CD3+) и относительного числа Т-эффекторов
(CD4+ -хелперов), что привело к общему снижению в них индекса
иммунореактивности (CD4+/CD8+).
Обнаружено в 1987 году значительное снижение активности цитолітичноі
НГК продолжало увеличиваться в 1988 и 1989 гг., в 1990 году ри-
вэнь цитолітичноі активности К-киллеров периферичноі крови обсте-
жених в значительной степени восстановился, тогда как функциональная активность
НГК росла гораздо медленнее, достигая в среднем 9,4%, что
существенно ниже контрольных значений. Продолжающееся повышение уровня акты-
вности К-клеток в 1991 году, видимо, можно рассматривать как частичную
компенсацию цитотоксичноі функции, что в определенной степени не ре-
лась НГК, функциональная активность которых мало изменилась по сравнению с
1990 годом. Содержание лимфоцитов периферичноі крови до 1990 г. набла-
делся до контрольного значения [ ]
В случае жителей города Кисва можно говорить о влиянии малых
доз радіаціі.
Вообще, согласно существующих представлений, малыми считаются дозы ио-
нізуючого облучения, превышающие естественный радиационный фон
(ПРФ) больше, чем в 10 раз. Относительно человека, такая доза складас
0,04-0,05 Гр при длительном облучении. НКДАР ООН рекомендус счи-
жать малыми дозы, превышающие ПРФ в 10-100 раз. Результаты
исследований влияния низких уровней ионизирующего излучения на здо-
здоровье людей дозволяс определить биологическую эффективность всех форм
променевоі дии, начиная с уровней ПРФ. При оценке малых доз опро-
мінення МКРЗ при ООН исходит из того, что любая доза, отличная
от нуля, с канцерогенным и генетически опасной.
Как уже отмечалось, одним из последствий аварии на ЧАЭС с три-
вале облучение населения малыми дозами радіаціі за счет про-
поступления в организм радиоактивных веществ, загрязняющих продук-
ты питания. При этом характерно медленное развитие патологі-
ческих процессов [ ]
Исследования, проведенные на крысах и мышах, показали, что три-
вале введение малых доз окиси трития (180 суток) приводит к стой-
кого опустошения стволового кроветворного пула, которое зберігасться
до конца жизни. Необратимое сокращение количества поліпотентних по-
передників Т-клеток отмечалось и после длительного внешнего —
-облучение. Наблюдались значительные нарушения Т-лимфопоэза, не
восстанавливались популяціі зрелых, функционально активных лімфоци-
тов. Иммунодефицитное состояние формировался в результате стійкоі гіпопла-
зіі лімфоідноі ткани. Причем гипоплазия тимуса и лимфатических
отделов выражена сильнее, чем в селезенке и костном моз-
ку [

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1 ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ ГРУПП.
Обследования проводились на практически здоровых волонтерах,
обучающихся в Черкасском государственном университете на фа-
культетах физвоспитания и естественном факультете.
Показатели клеточного иммунитета у практически здоровых во-
лонтерів студентов факультета физического воспитания и студен-
тов естественного факультета рассматривались как контрольные
исследования. Для проведения иммунологических обследований на каж-
ного волонтера заповнюсться карта индивидуального обстежен-
ния, разработанная в Республиканском центре иммунологических дос-
ліджень.
В контрольную группу отбирались волонтеры-мужчины, что
отвечали следующим критериям:
-отсутствие профессиональных вредностей;
-отсутствие бытовых вредностей (контакт с нитрокрасками,
гербицидами, пестицидами);
-отсутствие перенесенных инфекционных заболеваний, травм,
ожогов;
-отсутствие в анамнезе: хімікотерапіі (цитостатиками, гор-
мональними препаратами, иммунодепрессантами i імуностимулято-
рамы) и променевоі терапии;
-иммунологически не отягощенный семейный анемнез;
-отсутствие клинических признаков імунологічноі недостачи;
-отсутствие хронических заболеваний.
Карта индивидуального иммунологического обследования запов-
нювалась в двух экземплярах: один направлялся в Республікан-
ский центр імунологіі, второй оставался на кафедре физио-
логіі с последующим занотуванням на компьютере ІВМ РС/ХТ 286
в иммунологической лаборатории.
К исследовательских групп принадлежали студенты факультета физическо-
го воспитания и студенты естественного факультета, заз-
нали действия малых доз іонізуючоі радіаціі, проживая в зоніпо-
ситленого радиационного контроля (4-я зона).
К проведению иммунологического обследования на піддос-
лідних заполнялись карты индивидуального иммунологического
обследование.
Для проведения опытов по изменению показателей клеточного
иммунитета в периферической крови обследованию подлежали следующие
группы:
1-я группа — практически здоровые волонтеры, обучающиеся на
4-м курсе факультета физвоспитания ЧГУ;
2-я группа — практически здоровые волонтеры, щонавчаються на
4-м курсе естественного факультета ЧГУ;
3-я группа — лица, проживающие в зоне усиленного
радиационного контроля и учатся на 4-м
курсе факультета физвоспитания ЧГУ;
4-я группа — лица, проживающие в зоне усиленного
радиационного контроля и учатся на 4-м
курсе естественного факультета ЧГУ;

2.2 МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУБПОПУЛЯЦИЙ Т-ЛИМФОЦИТОВ
В ВЕНОЗНОЙ КРОВИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ
СИВОРОТОК
Специфические антитела связываются с мембранными антигена-
мы живых клеток, находящихся в суспензіі. Чтобы предотвратить
келінгу i індингу (отшелушиванию) антигенов после взасмодіі с
антителами, к суспензіі клеток добавляют 0.2% азида нат-
рию. В прямых методах ИФА используют специфические к
клеточных антигенов антитела, коньюгуючі с флуорисцентною
меткой. А маркировки клеток проводят как одноэтапную реакцию.
В косвенных методах ИФА в качестве антител используют
не меченые антитела к клеточным антигенам, а в качестве дру-
гих — меченные флуорохромом антитела к иммуноглобулинам. Мар-
ковка клеток проводят в два этапа.
Вторые антитела служат для выявления связанных с кліти-
ною первых антител.
Косвенные методы, как правило, чувствительнее прямых.
1. Венозную кровь (7 мл) с антикоагулянтом (9.8% цитрат нат-
рию 0.5 мл, или 25 ед/мл гепарина) розбавлясмо фосфатным
буфером в соотношении 1:1.
Состав фосфатного буфера:
КН РО 1,15 г.
Na HPO 0,2 г.
КСl 0,2 г.
NaCl 8 г.
на 1мл. дистильованоі воды
К фосфатного буфера додасмо 2 г. альбуминов сыворотки
кролика.
2. На свежеприготовленный одноступенчатый фікол-верографіно-
ный градіснт (2 мл) нашаровусмо с помощью пипетки с
грушей разбавленную ФБ (фосфатным буфером) кровь в центры-
фужній пробирке.
Методика изготовления фікол-верографин.
24,4 г. фіколу-400 растворяют в теплой дистиллированной
воде. Смешивают с 49,9 мл. 70% раствора верографіну. До-
водят об’см до 340 мл. Температура хранения раствора
+8 Сек.
3. Пробирки с градіснтом крови центрифугусмо течение
20-25 мин.
4. Відбирасмо пипеткой с грушей средний опалесцуючий
слой,содержащий лимфоциты в отдельные пробирки.
5. Відмивасмо популяцию лімфоциту от остатков градіснта
фосфатным буфером дважды, с помощью центрифугирования
в течение 10 минут. Декантусмо. Отмывку повторюсмо 2 раза.
6. Доводим концентрацию мононуклеарных клеток с помощью
ой разведения ФБ до уровня 1-5 х 10 кл./мл.
Контроль концентрацціі проводим вкамері Горясва (в од-
ном большом квадрате должно содержаться 20 лімфатич-
них клеток).
7. К 50 мкл полученных клеток добавлясмо мікропіпеткою по
5 мкл. антисыворотки LT3 — для определения количества
зрелых Т-клеток в венозной крови (CD3), LT1 — для
зрелых и почти зрелых Т-лимфоцитов (CD5), LT4 — для
определение Т-хелперов (CD4), LT8 — для определения
Т-супрессоров (CD8).
8. Інкубусмо смесь лимфоцитов с антисиворотками течение
20-25 мин при комнатной температуре.
9. Відмивасмо мононуклеары от остатков не зв’язаноі АС.
Для этого в каждую пробирку доливасмо по 2 мл ФБ с кро-
лячим альбумином (2.5%) i центрифугусмо течение 10
мин. Отмывку повторюсмо дважды. 10. К 50 мкл получены
смеси добавляемо по 5 мкл ФИТЦ. Інкубусмо 20-25 минут.
11. Проводим отмывку от флуоресцуючих антител мононук-
леари. Отмывку проводим аналогично відмивці от анти-
сивороток трижды. 12. Мононуклеары с помощью пипетки
наносим на предметное стеклышко. 13. Стекляшки поміщасмо на
подставки в чашки Петри с раствором формалина i фіксус-
мо препарат в его парах в течение 10 минут. 14. Зафіксо-
ваний препарат подсушивают при комнатной темпера —
туре.Готовые препараты хранятся в холодильной камере
в течение 3-х суток. 15. Анализ препаратов. Подсчет
проводится путем пересчета % флуоресцуючих клеток
на 100 просмотренных клеток в препарате. Мікроскопують за
помощью микроскопа с люминисцентной насадкой,
окуляр-7, об’сктив-90. В качестве імерсіі використовус-
ться водный раствор глицерина.
2.3. МЕТОДИКА ПОДСЧЕТА ЧИСЛА ЛЕЙКОЦИТОВ В КРОВИ
1. Палец протереть ватой смоченной 70% раствором спитту.
2. Одноразовым стерильным скарификатором проколоть
палец.
3. Первую каплю крови удалить ватой смоченной спиртом.
4. Несколько капель крови из пальца выдавить на пред-
метне стекло.
5. Капіляром Сали 0,02 мл. крови перенести в центры-
фужну пробирку с 0,4 мл. 3% раствора оцтовоі кислоты.
6. Легким поста постукиванием по пробирке перемешать содержимое
и оставить пробирку для разрушения эритроцитов.
7. Притереть покровное стекло к камере Горясва таким ли-
ном, чтобы появились Ньютонові кольца.
8. Подсчитать количество клеток в 25 больших квадра-
тах камеры Горясва.
9. Полученный результат пересчитать по формуле:
Х 10/20, где Х — количество клеток в 25 больших
квадратах.
Нормальное количество лейкоцитов в дорослоі человека коливас-
ться в пределах 4500-10000 в 1 куб.мм.

2.4 МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИФЕНРЕНЦІЙОВАНОІ ФОРМУЛЫ
ЛЕЙКОЦИТОВ.
Определение общей количества белых кровяных телец,
дас воображение проіх абсолютное количество. Но не дас сведений
про процентное соотношение (дифференцированную формулу) между
различными видами лейкоцитов и качественные изменения в их морфологии
при болезненных состояниях.
Определение диференційованоі формулы проводится на фар-
бованому мазке крови.
Дифференцированная формула характерно змінгюсться при ряде
болезненных состояний и масс чрезвычайно важное диагностическое i
прогностическое значение.
Нормальная дифференцированная формула дорослоі человека нас-
тупна:
молодые нейтрофильные кліжтини — 0%
палочкоядерные нейтрофильные клетки — 0-4%
сегментоядерні нейтрофильные клетки — 55-70%
лимфоциты — 20-40%
моноциты — 2-6%
эозинофильные клетки — 1-4%
базофильные клетки — 0-1%
плазматические клетки — 0-5%
ИЗГОТОВЛЕНИЕ МАЗКА КРОВИ.
1.Необходимым условием для правильного подсчета морфо-
логических особивостей кровяных клеток являсться ударил-
лозроблений и хорошо окрашен кровяной мазок.
Хорошо сделанный мазок крови должен отвечать следую-
ним условиям:
а) починасться на 1 см. от узкого края предметного
стекла и закінчусться на 2-3 см. от его второго края.
Общая длина мазка должна охватывать 1/2 — 3/4
стекла.
б) мазок должен быть рівномірноі толщины, а не мину-
подобный. Правельний мазок крови более толстый в начале, постепенной
во тоншас i закінчусться в виде следа, будто бы оставленного
тонкой щеточкой.
в) мазок должен быть отделенным от края.
Слой крови не должен доходить до другогоь края стекла.
Приготовление мазков проводится следующим образом: пред-
метне стекло, на котором будет сделан мазок, берут за один
конец большим и указательным пальцами правой руки. Второй
конец, отступая на 1 см. от края, осторожно дотикасться
к свіжоікраплі капілярноі кровііз пальца, ни в коем случае
не касаясь кожи в месте прокола. Капля крови перехо-
дить на стекло, она должна иметь диаметр 2-3 мм.
Предметное стекло перекладывают в левую руку взяв его ве-
ликим указательным и средним пальцямитак, чтобы капля знаходил
ась сверху на предметном стекле, со стороны указательного и среди-
него пальцев.
Шлифованное стекло, которым будет сделан мазок вставлясться
под углом 40-45 на 1-2 мм перд каплей, придержуючи большим
и указательным пальцами правой руки край шлифованного стекла i
оба краі предметного стекла. Шлифованное стекло сдвигают назад
так, чтобы оно касалось крови и капля распространялась в углу
между шлифованным и предметным стеклом. затем быстрым движением ру-
слушая стекло в зв оротньому направлении делают мазок.
В течение того времени когда делается мазок, большой івказівний
пальцы правой руки скользят по краям предметного стекла и тем
создают необходимую опору для наложения слоя крови.
ПОКРАСКА КРОВЯНОГО МАЗКА.
Для качественного исследование морфологии кровяных клеток-
покраска кровяного мазка имеет важное значение. Основу су-
часного окраски кровяных клеток положил петербургский
врач Д.Л.Романовсьий. В 1891 году он предложил свой
краситель. В 1902 году Гимза усовершенствовал краситель Романовского.
Краситель Романовского-Гимза складасться с лужноі i кис-
лоі части. Щелочная часть — азур 2, А кислая часть — эозин.
Азур 2 окрашен в ярко-синий цвет, а эозин в роже-
во-красный.
Чтобы приготовить основной раствор красителя растворяют 30
г. азуру 2-эозина i 0,8 г. азуру 2 в 250 мл. глицерина, наг-
ріваючи при этом 90-120 мин. при 50 С, а затем добавляют 250мл.
чистого метилового спирта. После отстаивания в течение 1-7
дней при комнатной температуре фильтруют.
ФИКСАЦИЯ КРОВЯНОГО МАЗКА.
Перед окраской мазок крови фильтруют. Это делается
для денатураціі белков в клетках, при сохранении іхжиттсвоі
структуры иж для закрепления клеток на предметном стекле. Для
фіксаціі используется абсолютный метиловый алкоголь. Время
фіксаціі — 3-5 мин.
Перед работой ,после фіксаціі, препарат заливают рабо-
чем раствором (разведенным) красителя Романовского-Гимза. I
оставляют на 20-40 минут. Затем его промывают, сушат, см-
смотрят под микроскопом.
ПОДСЧЕТ ДИФЕРЕНЦІЙОВАНОІ ФОРМУЛЫ.
Кровяные клетки не распределяются равномерно по всему
препраті.В начале и в конце мазка відкладасться большинство
крупных клеток с малым удельным весом (моноциты,
гранулоциты), а в середине — большинство малых клеток, с вели-
кой удельным весом (лимфоциты). Сравнительно наиболее правильное
соотношение складасться на участках показанных на рисунке:
┌───────┬─────┬───────────┬─────┬──────┐
│ │ ┌─┐ │ │ ┌─┐ │ │
│ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│ └─┘ └─┘ └─┘ └─┘ │
│ │
│ ┌─┐ ┌─┐ ┌─┐ ┌─┐ │
│ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ └─┘ │ │ └─┘ │ │
└───────┴─────┴───────────┴─────┴──────┘
Поэтому именно на них проводится дифференцированный подсчет
кровяных телец. Подсчет делается в виде меандров,
чтобы избежать повторения одних и тех же клеток.
Подсчитывают не менее 25 клеток (лучше по 100) в 4-х
участках, указанных на рисунке. РЕзультат выражают в %.
Вместо 4-х малых меандров, можно без грубоі ошибки,
описать 2 крупных меандров, т. е. слить 2 малых поля відцен-
тру с обеих сторон в одно большое, не делая разрыва в сере-
дыни. В таком случае в каждом из обоих больших полей підрахо-
щие минимально по 50 клеток (лучше по 100) и результат вы-
ражають в %. Для облегчения расчетов используют эле-
ментарні механические счетные машины.

2.5 ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРОВНЯ CD3+,CD4+,CD5+,CD8+ ЛИМФОЦИТОВ В
ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ.
1.Кровь брали стерильно с ліктьовоі вены утром, до применяемые-
ния пищи. Лимфоциты выделяли из гепаринізованоі крови цен-
трифугуванням на градіснті Фікол-Вірографіну (плотность 1,077
г/мл).
2.1-0,1 млн. лимфоцитов в об’смі 50 мкл. вносили в цен-
трифужні пробирки i к клеткам добавляли 5 мкл. моноклонально-
го антитела CD8 и инкубировали 30-45 минут. при +4с.
3.Добавляли 150 мкл. раствора Хенкса и центрифугировали 5
мин. при g 200.
4.Удаляли супернатант. Затем вносили 50 мкл. раствора
Хенкса, клетки суспендували, добавляли 150 мкл. раствора Хен-
кса и центрифугировали 5 мин. при g 200.
5.Удаляли супернатант. К осадку отмытых клеток дога-
валы 50 мкл. F(ab)2-Фрагментов овечьих антител к Ig мыши,
замеченных ФИТЦ i розбавлиних 1:100. Для разведения исполь-
товували физраствор, забуферений фосфатом (РВЅ), что містиь
0,5% желатина и 0,5% азида натрия. Клетки суспензували i
инкубировали 30 мин. при 4 Сек.
6.Клетки 2 раза отмывали как указано в п.п.3-4.
7.После удаления супернатанта клетки вы-
носили на предметное стекло и помещали в пары формалина для
фіксаціі на 10-1 мин. Меченые клетки анализировали с помощью
микроскопа с люминисцентной насадкой ЛН-30МС. Статистическую
обработку материалов проводили с использованием методики Андрю-
щенко.

2.6 СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА ДАННЫХ
Полученные цифровые результаты были обработаны методом
варіаційноі статистики по Стьюденту с помощью программы
складеноі аспирантом кафедры алгебры Андрущенко. Поскольку
программа написана на языке Ассемблер, то датиіі ропечатку не-
масс возможности, а потому ниже приводится, как пример, ре-
зультат обработки данных цісю программой.
Расчет основных характеристик выборки
——————————————
Показатель: cd
1. 2.00000
2. 3.00000
3. 7.00000
4. 8.00000
Среднее арифметическое — 5.000
Дисперсия — 75.111
Среднее квадратическое отклонение — 2.944
Погрешность среднего арифметического — 1.472
Коэффициент варіаціі — 58.878 %
Коэффициент асиметріі — 0.000
Эксцесс — -0.417
Программа обрабатывалась на ПЭВМ IBM PC/XT 286

_@ 3. СОСТОЯНИЕ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У
_@ ПРАКТИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ СТУДЕНТОВ ЧГУ.
Нами проведено дифференциальное исследование показателей клеток-
ного иммунитета у студентов 4 курса факультетов физвоспитания и
естественного факультета.
Установлено, что у практически здоровых волонтеров, нав-
ляются на 4-м курсе факультета физвоспитания и естественном фа-
факультете показатели уровня лейкоцитов в периферической крови статис-
тически достоверно не отличаются.(Табл.1).
Табл.N1. Уровень лейкоцитов и лимфоцитов у практически здоровых во-
лонтерів студентов 4-го курса естественнонаучного факультета
и факультета физвоспитания ЧГУ
┌─────┬──────────────────┬───────────┬───────┬──────┬──────┐
│N п/п│Группы подопытных│Показатели │Лейко- │Лимфо-│Лимфо-│
│ │ │статистич- │ты │цити │цити │
│ │ │ноі обработки│x 10/л │ % │ г/л │
├─────┼──────────────────┼───────────┼───────┼──────┼──────┤
│ 1 │Практически здоровы │ M │ 6,3 │32,5 │1,9 │
│ │волонтеры студенты│ б │ 1,27 │12,4 │0,2 │
│ │факультета физ- │ m │ 0,5 │5,3 │0,1 │
│ │воспитания │ n │ 6 │6 │6 │
├─────┼──────────────────┼───────────┼───────┼──────┼──────┤
│ 2 │Практически здоровы │ M │ 6,7 │24,5 │1,5 │
│ │волонтеры студенты│ б │ 1,4 │9,6 │0,7 │
│ │естественного │ m │ 0,6 │3,8 │0.1 │
│ │факультета │ n │ 6 │6 │6 │
├─────┴──────────────────┼───────────┼───────┼──────┼──────┤
│ │ t │ 0,63 │0,5 │1,3 │
│ │ p │ >0,05 │>0,05 │>0,05 │
└────────────────────────┴───────────┴───────┴──────┴──────┘
При этом относительное и абсолютное количество лимфоцитов в пе-
риферичній крови обеих групп находилась в пределах віковоі нормы.
Мы не наблюдали статистически достоверных различий уровня
відносноі іабсолютноі количества лимфоцитов.
Известно, что лимфоциты с гетерогенной популяцісю. В ос-
последний время субпопуляціі дифференцируют по експресіі поверхне-
вых маркеров [ ]
Взасмозв’язок фенотипических и функциональных вариаций
Т-клеток реалізусться через изменение их рецепторного поля и
експресіі молекул, принимающих участие в выполнении эффектор-
ноі функции клеток [ ]
Известно, что для Т-клеток характерна экспрессия Т-клеток-
них рецепторов. К таким рецепторам относятся поверхностные
маркеры CD3 [ ]
Экспрессия поверхностного маркера СD5 проявлясться на более
ранних стадиях развития Т-клеток.
Известно, что даже претомоцити могут иметь такой фенотип:
CD7+2+1-38+4-8-3-ТКР-
Таким образом, появление в крови лимфоцитов, экспрессирующих по-
верхневий маркер CD5, но не экспрессирующих СD3, свидетельствуют о
появление в периферической крови менее зрелых лимфоцитов. О появился-
ву в крови менее зрілоі субпопуляціі Т-клеток мы судили по
разницы между кількістюлімфоцитів СD3+ и СD5+.
Нами установлено повышение числа статистичнодостовірне
СD5+ лимфоцитов у практически здоровых волонтеров, нав-
ляются на первом курсе факультета физического воспитания ЧГУ.
(Табл. N 2).

Табл. N 2. Экспрессия СD3 — i СD5 — антигенов на
поверхности лимфоцитов крови периферичноі
практически здоровых волонтеров студентов
1-го и 4-го курса факультета физического
воспитания ЧГУ.
┌─────┬──────────────────┬────────────┬───────────┬───────────┐
│N п/п│Группа подопытных│Показатели │СD3+ │ СD 5+ │
│ │ │статис- ├───────────┼─────┬─────┤
│ │ │тичноі │ │ │ │
│ │ │обработки │ % г/л │ % │г/л │
├─────┼──────────────────┼────────────┼─────┬─────┼─────┼─────┤
│ 1 │Практически здоровы │ M │62,3 │1,2 │65 │1,3 │
│ │волонтеры студенты│ б │4,4 │0,13 │3,9 │0,19 │
│ │4-го курса │ m │1,97 │0,05 │1,6 │0,09 │
│ │ │ n │6 │6 │6 │6 │
├─────┼──────────────────┼────────────┼─────┼─────┼─────┼─────┤
│ 2 │Практически здоровы │ M │63,8 │1,05 │69,6 │1,1 │
│ │волонтеры студенты│ б │0,97 │0,5 │2,4 │0,6 │
│ │1-го курса │ m │0,4 │0,2 │0,98 │0,2 │
│ │ │ n │6 │6 │6 │6 │
│─────┴──────────────────┼────────────┼─────┼─────┼─────┼──── │
│ │ t │0,75 │1 │2,6 │1,5 │
│ │ p │>0,05│>0,05│<0,05│>0,05│
└────────────────────────┴────────────┴─────┴─────┴─────┴─────┘
Установлено отсутствие статистически достовірноі разницы
в експресіі поверхностного маркера СD + у практически здоровых
волонтеров — студентов 1-го и 4-го курсов факультета физического
ного воспитания.

4. СТАНКЛІТИННОГО МУНИТЕТА У ЛИЦ, ПРОЖИВАЮЩИХ В ЗОНЕ
УСИЛЕННОГО РАДИАЦИОННОГО КОНТРОЛЯ.
Исследовались 2 группы лиц проживающих в зонах уси-
ного радиационного контроля. 1-я группа-студенты 4-го курса
факультета физического воспитания, которые проживают в 4 зоне.
Особенностью цісі группы с то, что с 1986 по 1992 год во-
ны проживали в городах и селах черкаськоі области, которые отно-
сяться к зоне усиленного радиационного контроля, а с 1992 по
1996 Г. в г. Черкассы. Но все продукты питания студенты
привозили в 4-ю зону. Как известно при делении U тепловыми
нейтронами спостерігасться выход Сѕ и Sr. При близких
периодах полураспада (28,2 — 30,2 г)допустимый уровень заб-
руднення чернозема будет превышен в 20 раз.
Сейчас все чаще в связи с аварісю на ЧАЭС проявляс-
тся так называемый «влияние малых доз радіаціі», что потрапляс в
организм с пищей и водой. Главными изотопами имеющимися в рос-
линній i твармнній пищи с Сѕ и Sr. Это -изотопы, которые не рес-
струються обычными -счетчиками. Они накапливаются в
костной ткани и имеют тенденцию к нарастанию, т.т. в
человека створюсться внутрішнс источник излучения, ко-
каждый день активно травмус иммунную систему. Поэтому студенты 4-го
курса даже не проживая в зоне повышенного радиационного
контроля получают свою дозу облучения зпродуктами приве-
зеними из дома.
Вместе с тем эти студенты испытывают положительное влияние оп-
тима ных физических нагрузок.
В связи с вышеуказанным становятся понятными отриманіна-
мы результаты. (Табл. N 3,4).

Табл. N 3. Уровень лейкоцитов и лимфоцитов у лиц,
проживють в зоне усиленного радиационного кон-
тролю и практически здоровых волонтеров сту-
дентов 4-го курса факультета физического вы-
прятанья ЧГУ.
┌────┬──────────────────┬───────────┬──────┬──────┬──────┐
│Nп/п│Группы подопытных│Показатели │Лейко-│Лимфо-│Лимфо-│
│ │ │статистич- │цити │цити │цити │
│ │ │ноі обра- │х 10/л│ % │ г/л │
│ │ │работки данных│ │ │ │
├────┼──────────────────┼───────────┼──────┼──────┼──────┤
│ 1 │Практически здоровы │ M │6,3 │32,6 │1,9 │
│ │волонтеры студенты│ б │1,27 │12,7 │0,3 │
│ │4-го курса │ m │0,5 │5,2 │0,1 │
│ │ │ n │6 │6 │6 │
├────┼──────────────────┼───────────┼──────┼──────┼──────┤
│ 2 │Лица,прожива- │ M │5,9 │34,6 │2,1 │
│ │ют в зоне повы- │ бы │2,0 │4,9 │0,6 │
│ │щеного радиационно-│ m │0,9 │2,1 │0,3 │
│ │го контроля сту- │ n │5 │5 │5 │
│ │студенты 4-го курса │ │ │ │ │
├────┴──────────────────┼───────────┼──────┼──────┼──────┤
│ │ t │0,44 │0,4 │0,3 │
│ │ p │>0,05 │>0,05 │>0,05 │
└────────────────────────┴───────────┴──────┴──────┴──────┘

Табл. N 4 Экспрессия CD3 и CD5 -антигенов на поверхности
лимфоцитов периферичноі крови практически здоро-
вых волонтеров студентов 4-го курса факультета
физического воспитания и их однокурсников, что
проживающих в зоне усиленного радиационного кон-
тролю.
┌─────┬──────────────────┬──────────┬───────────┬───────────┐
│N п/п│Группы подопытных│Показатели │ CD 3+ │ CD 5+ │
│ │ │статистич-├─────┬─────┼─────┬─────┤
│ │ │ноі обра-│ % │г/л │ % │г/л │
│ │ │ки данных │ │ │ │ │
├─────┼──────────────────┼──────────┼─────┼─────┼─────┼─────┤
│ 1 │Практически здоровы │ M │62,3 │1,2 │65 │1,3 │
│ │волонтеры студенты│ б │4,84 │0,13 │3,9 │0,19 │
│ │4-го курса факуль-│ m │1,97 │0,05 │1,6 │0,08 │
│ │тета физвоспитания │ n │6 │6 │6 │6 │
├─────┼──────────────────┼──────────┼─────┼─────┼─────┼─────┤
│ 2 │Лица, прожива-│ M │59,8 │1,2 │63,2 │1,2 │
│ │ют в зоне уси-│ бы │9,6 │0,4 │5,2 │0,4 │
│ │ного радиационного │ m │4,2 │0,2 │2,3 │0,2 │
│ │контроля, студенты│ n │5 │5 │5 │5 │
│ │4-го курса факуль -│ │ │ │ │ │
│ │тета физвоспитания │ │ │ │ │ │
├─────┴──────────────────┼──────────┼─────┼─────┼─────┼─────┤
│ │ t │1,2 │0,1 │0,6 │0,5 │
│ │ p │>0,05│>0,05│>0,05│>0,05│
└────────────────────────┴──────────┴─────┴─────┴─────┴─────┘
Опыты убеждают в том, что у студентов 4-го курса фа-
факультета физвоспитания, подвергшихся хроническому воздействию фак-
торов аварии на ЧАЭС не постерігасться статистически дос-
товірних изменений показателей клеточного иммунитета.
Во второй серии экспериментов исследовалось состояние клеток-
ного иммунитета у студентов 4-го курса естественного факульте-
ту, что также подверглись воздействию малых доз радіаціі.
Установлено,что у этих студентов існус разница между зрівнювани-
мы средними вариационных рядов іпрактично здоровых однокур-
сників по показателям відносноі количества CD3+ и CD5+ лимфо-
цитів (Табл.N 5).
Однако патологічнаіонізуючого излучения может усилю-
наться другими патологическими факторами. Так в качестве этих фак-
торов может выступать эмоциональный стресс обусловлен наличием
тяжелых теоретических дисциплин: биохимия,физиология,разно-
манітні зазаліки и экзамены. Томму мы проанализировали состояние
літинного иммунитета в студентівприродничого факультета,
проживают в 4 зоне с практически здоровыми волонтерами, которые
невідчувають хронических стрессовых воздействий.
Нами установлено, что действие малых доз радіаціі посилюсться
такими экстремальными и эмоциональными нагрузками. Феноменпрояв-
лясться в зниженніабсолютноікількості лимфоцитов в перифе-
ричній крови, а таккож в снижении количества абсолютноі
клеток, экспрессирующих на своей поверхности клетки рецепторы
CD3+, CD5+). (Табл.N6,7).
Табл.N5. Экспрессия CD3 И CD5 — антигенівна поверхности лимфо-
цитів периферичноі крови практически здоровых
волонтеров студентов естественного факультета и
их однокурсников, проживающих в зоне усилен-
го радиационного контроля.
┌─────┬──────────────────┬───────────┬────────────┬────────────┐
│N п/п│Группы подопытных│ Показатели │ CD 3+ │ CD 5+ │
│ │ │ статистич-├──────┬─────┼──────┬─────┤
│ │ │ ноі обра-│ % │г/л │ % │г/л │
│ │ │ ки данных │ │ │ │ │
├─────┼──────────────────┼───────────┼──────┼─────┼──────┼─────┤
│ 1 │Практически здоровы │ M │63,8 │1,05 │69,6 │1,14 │
│ │волонтеры,студенты│ б │0,97 │0,5 │2,4 │0,6 │
│ │4-го курса природ-│ m │0,4 │0,2 │0,98 │0,2 │
│ │ничого факультета │ n │6 │6 │6 │6 │
├─────┼──────────────────┼───────────┼──────┼─────┼──────┼─────┤
│ 2 │Лица,прожива- │ M │50,1 │0,6 │58,2 │0,7 │
│ │в зоніпосиленого │ б │6,03 │0,14 │4,96 │0,15 │
│ │радиационного конт-│ m │1,6 │0,03 │1,3 │0,03 │
│ │ролю, студенты 4 │ n │14 │14 │14 │14 │
│ │курса естественнонаучного│ │ │ │ │ │
│ │факультета │ │ │ │ │ │
├─────┴──────────────────┼───────────┼──────┼─────┼──────┼─────┤
│ │ t │8,6 │2,25 │7,1 │1,5 │
│ │ p │<0,001│<0,05│<0,001│>0,05│
└────────────────────────┴───────────┴──────┴─────┴──────┴─────┘

Табл.N6. Уровень лейкоцитов и лимфоцитов у практически
здоровых волонтеров студентов 4-го курса при-
родничого факультета, и студентов природничго
факультета, проживающих в 4-й зоне.
┌────┬───────────────────┬───────────┬──────┬──────┬──────┐
│Nп/п│Группы подопытных │Показатели │Лейко-│Лимфо-│Лимфо-│
│ │ │статистич- │цити │цити │цити │
│ │ │ноі обра- │х 10/л│ % │ г/л │
│ │ │работки данных│ │ │ │
├────┼───────────────────┼───────────┼──────┼──────┼──────┤
│ 1 │Практически здоровы │ M │6,3 │32,6 │1,9 │
│ │волонтеры, студенчес- │ бы │1,27 │12,7 │0,3 │
│ │ти 4-го курса │ m │0,5 │5,2 │0,1 │
│ │ │ n │6 │6 │6 │
├────┼───────────────────┼───────────┼──────┼──────┼──────┤
│ 2 │Лица, прожива- │ M │5,5 │22,2 │1,2 │
│ │ют в 4-й зоне, │ б │1,4 │4,9 │0,3 │
│ │студенты 4-го курса│ m │0,4 │1,3 │0,07 │
│ │ │ n │14 │14 │1,4 │
├────┴───────────────────┼───────────┼──────┼──────┼──────┤
│ │ t │1,25 │1,94 │5,83 │
│ │ p │>0,05 │>0,05 │<0,001│
└────────────────────────┴───────────┴──────┴──────┴──────┘

Табл.N 7. Експроесія CD3 и CD5-антигенов на поверхности
лимфоцитов периферичноі крови у практически здо-
рових волонтеров (студентов 4-го курса) и
лиц, проживающих в 4-й зоне (студентов 4-го
курса естественнонаучного факультета).
┌─────┬──────────────────┬──────────┬────────────┬────────────┐
│N п/п│Группы подопытных│Показатели │ CD 3+ │ CD 5+ │
│ │ │статистич-├─────┬──────┼─────┬──────┤
│ │ │ноі обра-│ % │г/л │ % │г/л │
│ │ │ки данных │ │ │ │ │
├─────┼──────────────────┼──────────┼─────┼──────┼─────┼──────┤
│ 1 │Практически здоровы │ M │62,3 │1,2 │65 │1,3 │
│ │волонтеры,студенты│ б │4,84 │0,13 │3,9 │0,19 │
│ │4-го курса факуль-│ m │1,97 │0,05 │1,6 │0,08 │
│ │тета физвоспитания │ n │6 │6 │6 │6 │
├─────┼──────────────────┼──────────┼─────┼──────┼─────┼──────┤
│ 2 │Лица, прожива-│ M │50,1 │0,6 │58,2 │0,7 │
│ │в зоніпосиленого │ б │6,03 │0,14 │4,96 │0,15 │
│ │радиационного конт-│ m │1,6 │0,03 │1,3 │0,03 │
│ │ролю, студенты 4 │ n │14 │14 │14 │14 │
│ │курса естественнонаучного│ │ │ │ │ │
│ │факультета │ │ │ │ │ │
├─────┴──────────────────┼──────────┼─────┼──────┼─────┼──────┤
│ │ t │4,8 │10,34 │3,3 │7,05 │
│ │ p │<0,01│<0,001│<0,01│<0,001│
└────────────────────────┴──────────┴─────┴──────┴─────┴──────┘
Установлено, что через 7-9 лет после аварии на ЧАЭС в
лиц эвакуированных из 1-i радіаційноі зоны, спостерігасться
тенденция к снижению количества лейкоцитов в периферической
крови, в то время как уровень лейкоцитов у жителей-i зоны ма-
ло відрізнясться от контроля.
Спостерігасться абсолютное піджвищення числа лимфоцитов
в обеих группах испытуемых. Но присубпопуляційному анализе
масмо такую картину.
Установлено статистическую достовіроність снижение числа
клеток, щоекспресують CD3-пан-Т-клеточный маркер у лиц,
проживают в 4-й радиационной зоне. Через рецепторный ком-
комплекс CD3 TKR реалізусться классический путь активаціі Т-лимфо-
цитів, поэтому снижение числа клеток акцепторов активаціі CD3+
может свидетельствовать о впечатлениях данного пути імунноі ответы.
У лиц, проживающих в четвертой радиационной зоне на
отличие от эвакуированных из 30 км. зоны спостерігасться дос-
товірне снижение количества клеток с фенотипом CD4,то есть
клеток-хелперов.
Достовірноі зависимости между експресісю CD8 антигена и
дозами облучения не выявлено.
Снижение експресіі CD4-поверхностного маркера лимфоцита-
мы при гии малых доз радіаціі может быть проявлением радиационно-
го старения імунноі системы. Соотношение CD4+/CD8+ (иму-
норегуляторний индекс с важным показателем імунноі системы.
I нарушение імуннорегуляторного индекса на пользу
клеток-супрессоров, при длительному действию малых доз может привести
к вторичных иммунодефицитных состояний, отмены протипухлинно-
го и противовирусного иммунитета.(Табл.8,9).

Таблица N 8. Уровень лейкоцитов и лимфоцитов в перифе-
ричній крови особей, что были підвержені дии
ионизирующего излучения в различных режимах.
┌────────────────────┬────────────────────────────────────┐
│Группы исследуемых │ ПОКАЗАТЕЛИ │
│ ├──────────┬─────────────────────────┤
│ │Лейкоциты │ Лимфоциты │
│ │ ├──────────────┬──────────┤
│ │ │ % │ х10 /л │
├────────────────────┼──────────┼──────────────┼──────────┤
│1. Контроль(n=13) │6,2 +0,41 │ 28,0 + 0,94 │1,70+0,137│
├────────────────────┼──────────┼──────────────┼──────────┤
│2. Особи,эва- │5,4 +0,50 │ 35,0 + 2,64 │1,80+0,118│
│ куйовані с 1-i │ │ │ │
│ радіаційноі зоны │ │ │ │
│ (n=12) │ │ │ │
│────────────────────┼──────────┼──────────────┼──────────┤
│3. Особи, о- │6,3 +0,32 │ 24,0 + 1,36 │1,52+0,120│
│ живають в 4-Й │ │ │ │
│ радиационной зоне │ │ │ │
│ (n=27) │ │ │ │
├────────────────────┼──────────┼──────────────┼──────────┤
│ t 1-2 │ 1,23 │ 2,50 │ 0,55 │
│ t 1-3 │ 0,076 │ 1,68 │ 0,99 │
└────────────────────┴──────────┴──────────────┴──────────┘

Таблица 9. Экспрессия Т-клеточных маркеров лимфоцитами в
особей, что были підвержені влияния іонізуючоі
радіаціі в различных режимах.
┌──────────────┬────────────────────────────────────────────────┐
│ Группы │ ПОКАЗАТЕЛЯ И │
│исследуемых ├───────────────────┬──────────────────┬─────────┤
│ особей │CD4+ -л імфоцити │CD8+ -лимфоциты │CD4+/CD8+│
│ ├────────┬──────────┼────────┬─────────┤ │
│ │ % │ 10 /л │ % │ 10 /л │ │
│ │ │ │ │ │ │
├──────────────┼────────┼──────────┼────────┼─────────┼─────────┤
│Контроль(n=13)│41,0+1,4│0,69+0,06 │30,0+1,7│0,51+0,59│1,40+0,08│
├──────────────┼────────┼──────────┼────────┼─────────┼─────────┤
│Лица, │34,0+1,8│0,65+0,03 │27,0+1,1│0,47+0,40│1,30+0,06│
│эвакуированы из │ │ │ │ │ │
│1-i советов. зоны │ │ │ │ │ │
│(n=12) │ │ │ │ │ │
├──────────────┼────────┼──────────┼────────┼─────────┼─────────┤
│Лица, │34,0+1,1│0,51+0,04 │28,0+0,9│0,41+0,03│1,24+0,09│
│проживающих в │ │ │ │ │ │
│4-Й советов. зоне │ │ │ │ │ │
│(n=27) │ │ │ │ │ │
├──────────────┼────────┼──────────┼────────┼─────────┼─────────┤
│ t 1-2 │3,68 │0,60 │1,65 │0,56 │0,98 │
│ t 1-3 │3,78 │2,43 │0,99 │1,52 │1,23 │
│ t 2-3 │1,22 │2,72 │0,89 │1,23 │0,53 │
└──────────────┴────────┴──────────┴────────┴─────────┴─────────┘

ВЫВОДЫ
1. РiвеньCD3+,CD4+,CD5+,CD8+-лимфоцитов у практически
здоровых лиц, проживающих на черкасщине нахо-
дится на уровне показателей жителей других районов
Украины.
2. У студентов, подвергшихся воздействию малых доз радіаціі
спостерігасться нарушения в регуляторной ланке
иммунитета, что спостерігасться в снижении імуноре-
гуляторного индекса (CD4+/CD8+).
3. Малые дозы ионизирующего излучения влияют на
состояние клеточного иммунитета, что проявлясться в продол-
женни абсолютноі i відносноі количества зрелых
Т-лимфоцитов (экспрессирующих поверхностный маркер CD3+).
4. Дозированная физическая нагрузка викликас
стабилизацию показателей Т-клеточного иммунитета в
лиц, подвергшихся воздействию малых доз радіаціі.

ЛИТЕРАТУРА
1. Анохин Ю.Н., Норец Т.А., Белоусова А.В. Стимуляция вос-
становления иммунологической реактивности у мышей пос-
ле облучения // Иммунол.-1989.- N 1.- c.44-46.
2. Баева Е.В. Влияние трийодтиронина на синтез нуклеино-
вых кислот иммуноцитами в культуре клеток // Проблемы
эндокринологии.- 1989.- N 1,- с. 79-83.
3. Беляков Ы.М., Кузьменюк А.Ы., Ярилина А.А. Влияние -из-
лучения на пролиферативную активность камбиального эпи-
телия в культуре стромальных клеток тимуса // Радиобио-
лог. — 1993.- Т.33.-Вып.2.-с.214-218.
4. Борисова А.М., Сетдикова Н.Х., Пинегин Б.В. Клинико-ым-
мунологическая эффективность применения оксиметацила в
больных с вторичным иммунодефицитным состоянием //Имму-
нол.- 1994.- N 6.- с.48-50.
5. Действие ионизирующей радиации на организм человека //
Под ред. Е.П. Кронкайте и др.-Медгиз.-1960.- с.8-9,
15-149.
6. Добровинская А.Г., Шапошникова В.В., Корестов Ю.Н. и
др. Влияние агентов, ингибирующие процессы киллинга на
интерфазную гибель облученных тимоцитов // Иммунол.-
1989.-N 6.- с.33-35.
7. Елисеева Н.А., Левитман М.Х.,Корыстов Ю.Н. и др. Влия-
ние малых доз облучения на бланстрансфрмацию лимфоци-
ооо крови крыс // Иммунол.- 1994.- N 1.- с.28-30.
8. Иммунология: В 3-х т. Т.1. Пер. с англ. // В.Пола.- М.:
Мир, 1987-1989. — с.26-31, 93-111, 306-312.
9. Итоги науки и техники. Иммунология. 1992.- Т.23. —
с.5-8.
10. Капитоненко А.М., Дочкин Ы.Ы. Клинический анализ лабо-
раторных исследований.- М.- Воениздат.- 1988.
11. Кириллова Е.Н., Мурзитна А.Д., Муксинова К.Н.Клеточные
основы иммунодефицитного состояния в отдаленном перио-
где после хронического радиационного воздействия //
Иммунол.- 1989.- N 1.- с.32-33.
12. Климарская Н.Н., Левицина Г.М., Шалькова Г.А. Радиоак-
тивные изотопы и иммунитет.- М.: Энергоиздат.- 1969.
13. Коляда Т.I., Волянский Ю.Л., Васільев М.В. Проблема
выявление скрытых форм вторичных иммунодефицитов и
биологические последствия Чорнобильськоі аварии //Укр.радиол.
Же.- 1995.- N 1.- с.44-47.
14. Любченко П.Н., Юрина Т.Н., Креславская Е.Е. и др. Сос-
тояние иммунной системы у людей, учавствовавших в лик-
видации последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Имму
нол.- 1990.- N 6.- с. 60-62.
15. Любченко П.Н., Юрина Т.Н., Дубинина Е.Бы. и др. Динами-
ка некоторых показателей иммунитета у мужчин, учавство-
вавших в ликвидации последствий аварии на Черно-
быльской АЭС в 1986 и 1987 гг. // Иммунол.-1994.- N 3.-
с. 53-55.
16. Мельников А.Ф., Самбуров Н.Б., Розенфельд Л.Г. Динамика
состояния эмунноі системы у жителей Киева после аварии на
Чернобыльской АЭС // Укр. Радиол. Же.- 1993.- N 2.- с.
81-84.
17. Ноздрачев А.Д. Общий курс физиологии человека и живот-
ных.- М.: Высшая школа.- Т.2.- 1991.
18. Пастер В.Ы., Овод В.К., Вихоть Н.Е. Иммунологя (практи-
кум). К.: Выща школа.- 1989.- с.302.
19. Петров Г.В. Иммунология. М.: Медицина,- 1983.
20. Петров Г.В., Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Оценка иммунно-
го статуса человека в норме и при патологии //
Иммунол.- 1994.- N 6.- с. 6-9.
21. Савина М.П., Ярилин А.А. Поражение тимуса ипопуляции Т-
лимфоцитов в ранние и отдаленные сроки после локально-
го облучения лимфоидных иэндокринных органов // Имму-
нол.- 1994.- N 4.- с. 39-43
22. Сарыбаева Д.В., Захарова Л.А., Михайлова А.А. Актива-
ция неспециических Т-клеток-супрессоров в условиях ба-
рокамерной гипоксии // Иммунол.- 1990.- N 1.- с.66-68.
23. Смоляр В.Ы. Ионизирующая радиация и питание. -К.: Здо-
ровья,-1992.- с.94-119.
24. Смирнов В.С., Ващенко В.Ы., Морозов В.Г. Состояниеимун-
ной системы у людей через 2 года послевоздействия фак-
торов радиационной аварии // Иммунол.- 1990.- N 6.- с.
63-65.
25. Смирнова В.П. Математическое моделирование радиацион-
ных воздействия на систему иммунитета // Иммунол.- 1984.-
N 2.- с.38-42.
26. Ткачева Г.А., Балаболкин М.Ы., Ларичева Ы.П. Радиоимму-
нологические методы исследования (справочник). -М.: Ме-
дицина.- 1983. с.192.
27. Хансон К.П., Комар В.Е. Молеулярные механизмы радиа-
ционной гибели клеток. — М.: Медицина,- 1985.
28. Харченко Т.Ю., Ярилин А.А., Мирошниченко И.В и др.
Влияние пренатального облучения на развитие тимуса и
селезенки мышей //Иммунол.- 1994.- N 3.- с.15-18.
29. Шубик В.М. Проблемы экологичесской иммунологии. М.: Ме-
дицина, — 1976.
30. Ярилин А.А., Панчук В.Г., Гриневич Ю.А. Структура тима-
са и дифференцировка Т-лимфоцитов. К.: Научная мысль ,-
1991.
31. Ярилин А.А. Роль дифференцировки и модификации в формы-
ровании разнообразия Т-лимфоцитов // Проблемы и пер-
спективы современной иммунологии. Метод. анализ.- 1988
с. 234-247.
32. Ярошинская А.А. Чернобыль с нами.- М.: Книга,- 1991.-
с. 100-103.
33. Nakamura N., Kusinoki Y., Akiyama M. Radiosensitiviti
of CD4 или CD8 Positive Humane N-limphocytes by an In
Vitro Colony Formation assay // Rad. Res.-1990.-V.
123.-P. 224-227.
__________)_ _)_____________<____*.FRM_________________________________________*.MAC______________________________________________________________-___В_______ _